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蠕動泵柱層析步驟介紹

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1.取樣  
拿到樣品后用毛細管蘸取少量的樣品放入離心管中,加入相應的溶劑將樣品溶解,標號后作為對照。  
2.跑板  
將取出的樣品與要分離的樣品點在同一塊硅膠板上進行跑板,確定第幾個點是將要分離出來的樣品。  
3.裝柱  
將少量的棉花(棉花太少會露出硅膠,太多過濾的較慢)塞入柱子低端防治硅膠露出,配制硅膠溶劑時濃度應適當(濃度過大易造成干柱,溶度過小會大量浪費溶劑),將硅膠裝入柱子直徑的15—20倍高即可(柱子過高浪費時間且沒有必要,柱子過低會造成物質沒有分離開就應經被洗下)。  
倒入一定量的硅膠之后將硅膠壓實,然后將溶液壓**和硅膠面向近處,重復加入硅膠到達預定的高度,然后加入一定量的無水硫酸鈉(作用是防治在加樣時將硅膠面沖的變形),然后用手稍微彈動柱子將無水硫酸鈉彈平,在溶劑將柱內壁的硅膠及無水硫酸鈉洗凈。  
4.加樣  
將樣品用溶劑溶解后加入柱內(加入溶液時從中間像外圈旋轉滴加,不要將柱面沖出坑),并用溶劑反復洗瓶子3遍左右(洗瓶子時將溶劑沿磨砂口加但不能碰到瓶內壁,否則會污染試劑),將洗后的液體轉移**柱子內。  
5.過柱  
先用滴管沿柱內壁加入溶液,溶液到達一定高度后再將配制的溶液倒入到柱子上面的球型漏斗內,加壓,先用錐形瓶接取前面柱內的溶劑,然后當溶液到達一定的高度時開始用試管接,然后不斷的檢驗試管中是否有樣品洗出,當從有樣品洗出到沒有時,**個樣品就被完全洗出,跳躍的點一定數量的點,然后進行跑板,確定沒有自己要分離的樣品后就可以倒掉,繼續洗柱子。換取極性稍大的溶劑,分離到第二個樣品后同**個做同樣的處理,直**得到自己要的樣品。  
6.旋干  
將的的樣品轉移**圓底瓶中旋干,在將樣品瓶安裝好后,先打開冷凝系統和加熱系統,然后打開旋轉和抽氣,緩慢關閉活塞,此時不停的觀察是否有氣泡,若有氣泡應放入一定氣體,然后緩慢關閉直**沒有氣泡,旋干后用油泵抽氣(油泵的真空度比選轉蒸發儀的真空度更大,能抽的更干)然后放入稱量過質量的小瓶中,封口后放入冰箱內保存。
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